分辨率可比普通显微镜高
显微镜的分类和原理以及应用电子显微镜:(electron microscope,EM)
1.原理:
(1)电子显微镜不使用可见光,而是利用电子束穿透标本来聚焦.
(2)显微镜的解析度和其所使用的放射线波长成反比:电子束的波长远比可见光的波长短得多→现代电子显微镜解析度可达0.2nm(为光学显微镜的1000倍以上)
2.种类:
(1)穿透式电子显微镜:(TEM)
jTEM用於研究细胞内部的超显微构造
kTEM的电子束要能穿透切成薄片的标本
lTEM用可以弯曲带电电子抛射轨道的电磁时来当作透镜→用於聚焦和放大
m利用重金属元素将细胞特定部位染色→加强影像的对比
n影像最后被投射於萤幕上供观察和拍照
(2)扫描是电子显微镜:(SEM)
jSEM特别适用於研究标本表面的细微构造
k标本表面先镀上一薄薄的一层黄金
l利用电子束扫描标本表面→电子束激发了标本表面的电子→被激发的电子被聚集后再聚焦於萤幕上(显现标本表面的形态)
mSEM的景深很深→可供显示三度空间的形态
3.缺点:
(1)先前用来处理标本的化学或物理方法→会杀死细胞
(2)显微照片上会出现一些活细胞所没有的添加物
、投射电子显微镜基本原理
在光学显微镜下无法看清小于0.2μm的细微结构,这些结构称为亚显微结构(submicroscopic structures)或超微结构(ultramicroscopic structures;ultrastructures).要想看清这些结构,就必须选择波长更短的光源,以提高显微镜的分辨率.1932年Ruska发明了以电子束为光源的透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM),电子束的波长要比可见光和紫外光短得多,并且电子束的波长与发射电子束的电压平方根成反比,也就是说电压越高波长越短.目前TEM的分辨力可达0.2nm.
电子显微镜与光学显微镜的成像原理基本一样,所不同的是前者用电子束作光源,用电磁场作透镜.另外,由于电子束的穿透力很弱,因此用于电镜的标本须制成厚度约50nm左右的超薄切片.这种切片需要用超薄切片机(ultramicrotome)制作.电子显微镜的放大倍数最高可达近百万倍、由电子照明系统、电磁透镜成像系统、真空系统、记录系统、电源系统等5部分构成.
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