上游引物:GAATTCacgcgcaaga ttagg(后面可以继续加几个碱基,用PRIMER 5.0看一下,引物设计多少个碱基合适,每个基因序列不同.我用TOYOBO的KOD PLUS的话,就一般引物设计18~22个碱基,一般都能扩增出来)
下游引物:GCGGCCGCccttgggaagaaaaagc(后面可以继续加几个碱基,用PRIMER 5.0看一下,引物设计多少个碱基合适,每个基因序列不同)谢谢你,不过这个要求是什么意思啊“该基因将被连接到一信号肽编码序列(…NNN NNN NNN GAA TTC NNN NNN…)下游,可形成融合蛋白”那要看你怎么构建载体了。方法一:你要么通过酶切的手段,把信号肽先连入载体中,再把基因连入信号肽后。或者先把基因连入载体中,再把信号肽连入载体中。方法二:做搭桥PCR。你搜索一下就知道了。汗!我没有绘图的工具,以前就面对面直接手写绘图解释了,现在只能帮到你这么多。
想用PCR扩增下面一段序列,急求高手写出上游引物和下游引物.
想用PCR扩增下面一段序列,急求高手写出上游引物和下游引物.
要求上游加EcoRⅠ酶切位点、下游加BamH I酶Not I 切点;该基因将被连接到一信号肽编码序列(…NNN NNN NNN GAA TTC NNN NNN …)下游,可形成融合蛋白,上游引物的切点要满足需要.
EcoR I:GAATTC Not I:GCGGCCGC
1 acgcgcaaga ttaggtgggg cgccagagcc ggggcacctg cgcaggcttg gctgcgccct
61 ctcgcgccgc acgctctgcg ggttcctccc ttcttccgag cctctcctct ggccgccgcg
121 cgggagagag gccgagatgg cagatgagat tgccaaggct caggtcgctc ggcctggtgg
181 cgacacgatc tttgggaaga tcatccgcaa ggaaatacca gccaaaatca tttttgagga
241 tgaccggtgc cttgctttcc atgacatttc ccctcaagca ccaacacatt ttctggtgat
301 acccaagaaa catatatccc agatttctgt ggcagaagat gatgatgaaa gtcttcttgg
361 acacttaatg attgttggca agaaatgtgc tgctgatctg ggcctgaata agggttatcg
421 aatggtggtg aatgaaggtt cagatggtgg acagtctgtc tatcacgttc atctccatgt
481 tcttggaggt cggcaaatgc attggcctcc tggttaagca cgttttgggg ataattttct
541 cttctttagg caatgattaa gttaggcaat ttccagtatg ttaagtaaca cacttatttt
601 tgcctgtgta tggagagatt caagaaataa ttttaaaacc gcatacataa taaaagacat
661 tgttgcatgg cttatagtct ctctgagtgt tgcgtttgat ttgttatttt aaaaacatat
721 ttgttggaat atgtgaaggt gggtttataa ttttggatgt ttcttgcttt ttcttcccaa
781 gg
//
要求上游加EcoRⅠ酶切位点、下游加BamH I酶Not I 切点;该基因将被连接到一信号肽编码序列(…NNN NNN NNN GAA TTC NNN NNN …)下游,可形成融合蛋白,上游引物的切点要满足需要.
EcoR I:GAATTC Not I:GCGGCCGC
1 acgcgcaaga ttaggtgggg cgccagagcc ggggcacctg cgcaggcttg gctgcgccct
61 ctcgcgccgc acgctctgcg ggttcctccc ttcttccgag cctctcctct ggccgccgcg
121 cgggagagag gccgagatgg cagatgagat tgccaaggct caggtcgctc ggcctggtgg
181 cgacacgatc tttgggaaga tcatccgcaa ggaaatacca gccaaaatca tttttgagga
241 tgaccggtgc cttgctttcc atgacatttc ccctcaagca ccaacacatt ttctggtgat
301 acccaagaaa catatatccc agatttctgt ggcagaagat gatgatgaaa gtcttcttgg
361 acacttaatg attgttggca agaaatgtgc tgctgatctg ggcctgaata agggttatcg
421 aatggtggtg aatgaaggtt cagatggtgg acagtctgtc tatcacgttc atctccatgt
481 tcttggaggt cggcaaatgc attggcctcc tggttaagca cgttttgggg ataattttct
541 cttctttagg caatgattaa gttaggcaat ttccagtatg ttaagtaaca cacttatttt
601 tgcctgtgta tggagagatt caagaaataa ttttaaaacc gcatacataa taaaagacat
661 tgttgcatgg cttatagtct ctctgagtgt tgcgtttgat ttgttatttt aaaaacatat
721 ttgttggaat atgtgaaggt gggtttataa ttttggatgt ttcttgcttt ttcttcccaa
781 gg
//
数学人气:842 ℃时间:2020-02-05 13:51:45
优质解答
我来回答
类似推荐
猜你喜欢
- 1【个性发展自我评价和特长成果】400-600字之间.
- 2“因为在那时有各种各样的活动”用英语怎么说
- 3甲船以6km/s速率向东行驶,乙船以8km/s的速率向南行驶,在中午十二点整,乙船位于甲
- 4Tom is a little fatter boy than he wants to be,he tries not to eat too much翻译
- 5高中数学必修2的关于直线与圆的位置关系的题
- 6当力的作用线通过支点时,力臂为0吗?
- 7已知一个数的两个平方根分别是2a-1和4-3a,求这个数是多少
- 8初二匀速直线运动有关的物理题目..速度..
- 9This lesson is easy.(改同义句)
- 10一辆汽车从甲地到乙地,原来要用五小时,现在只要四小时,时间缩短了20%,速度加快了20%是对还是错